Dados do Trabalho

Título

OBTENÇAO DE LINHAGENS DE PLANTAS MODIFICADAS COM POTENCIAL DE CONVERTER FOSFITO EM FOSFATO

Resumo

Os fertilizantes fosfatados são classificados como fontes não-renováveis e, no ritmo atual de exploração, as jazidas conhecidas de apatita de baixo custo de extração para fabricação de fertilizantes fosfatados, devem esgotar-se em aproximadamente 60-70 anos. No entanto, o fosfito, forma reduzida do fósforo, foi apontado como um fertilizante optativo depois da Segunda Guerra Mundial, apresentando maior solubilidade, menor reatividade com os componentes do solo e incapacidade da maioria dos microrganismos de usá-lo como fonte de fósforo. O objetivo deste trabalho foi produzir plantas modificadas de arroz, capazes de metabolizar o fosfito, ou seja, convertê-lo a fosfato. Neste estudo, produzimos uma construção genética, em que o gene PtxD de Pseudomonas stutzeri foi sintetizado com ajuste de códons para arroz (Oriza sativa L) e colocado sob o controle do promotor da ubiquitina 1 de milho, o que garante uma expressão forte e constitutiva do gene em arroz. O trabalho foi conduzido no Laboratório de Nutrição Mineral de Plantas da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (UFRRJ) onde calos embriogênicos originados do escutelo de sementes maduras de arroz foram infectados com Agrobacterium tumefaciens carregando a construção genética ZmUBIL1:PtxD. O marcador de seleção usado foi o gene que codifica a higromicina fosfotransferase (hpt), enzima capaz de degradar o antibiótico higromicina. Após seleção dos calos resistentes, 44 linhagens transgênicas foram regeneradas in vitro, aclimatadas em câmara de crescimento de plantas e levadas para casa de vegetação até obtenção das sementes. Durante o cultivo das linhagens, amostras de folhas foram coletadas e o DNA extraído para confirmação da transformação, que ocorreu por meio de reação de PCR para amplificar o gene PtxD. Três linhagens foram selecionadas pela capacidade de se desenvolverem satisfatoriamente em solução nutritiva com fosfito como única fonte de P.

Palavras-chave

: Oriza sativa; fosfito; ptxD, adubação fosfatada